Suche: B2

Zur Analyse von vitaminhaltigen alkoholfreien Getränken werden HPLC-Methoden erfolgreich eingesetzt. Diese lassen sich jedoch meist nicht auf die in Würze- und Biermatrix vorliegenden Konzentrationen übertragen.

Zur Analyse von Vitamin B₁ und B₂ wird ein Reagenzienkit zur Bestimmung der Vitamine B₁ und B₂ in Vollblut der Firma Chromsystems GmbH/München verwendet. Die Applikationen zeichnen sich durch eine einfache Durchführbarkeit sowie einen geringen apparativen Aufwand aus, da ein isokratisches HPLC-System genügt. Die Anwendung der Applikation wurde in Zusammenarbeit mit dieser Firma in Hinsicht auf die veränderte Probenmatrix (Maische, Würze und Bier) modifiziert.

Der VitaFast® Vitamin B₂ (Riboflavin) Mikrotiterplattentest ist ein mikrobiologisches Verfahren zur Bestimmung des Gesamtgehaltes an Vitamin B₂ in Lebensmitteln und Getränken.
Zur Bestimmung des zugesetzten Vitamin B₂ wird das Getränk enzymatisch vorbehandelt und anschließend heiß extrahiert und falls erforderlich mit sterilem Wasser aus dem Testkit verdünnt.
Zur Bestimmung des Gesamtgehaltes an Vitamin B₂ (natürliches und zugesetztes) muss die Probe durch eine enzymatische Hydrolyse aufgeschlossen werden.

Das Vitamin-B₂-Assay-Medium und der verdünnte Extrakt werden in die Kavitäten einer Mikrotiterplatte gegeben, die mit Lactobacillus rhamnosus beschichtet sind. Lactobacillus rhamnosus ist auf die Anwesenheit von Vitamin B₂ angewiesen. Nach Zugabe von Vitamin B₂ als Standard oder als in einer Probe enthaltenes Vitamin wächst der Keim solange, bis das Vitamin aufgebraucht ist. Die Inkubation erfolgt bei 37 °C für 44‑48 h.
Das Wachstum von Lactobacillus rhamnosus in Abhängigkeit vom Vitamin B₂ wird als Trübung gemessen und mit einer Standardkonzentrationsreihe verglichen. Die Messung erfolgt im Mikrotiterplattenphotometer bei 610‑630 nm (alternativ bei 540‑550 nm).

Vitamin B₂, Riboflavin und Riboflavin-5-Monophosphat werden mittels Umkehrphasen-HPLC getrennt und mit einem Fluoreszenz-Detektor bestimmt.