Bestimmung der organischen Säuren mittels Reversed-Phase Chromatographie/Ionenchromatographie
Diese Methode eignet sich für Wein, Fruchtsäfte und andere alkoholfreie Getränke
Die organischen Säuren werden mittels zweier kombinierter Säulen, Umkehrphasen-HPLC und Ionenaustauschersäule, getrennt und mit einem UV-Detektor bestimmt.
Bestimmung von L-Äpfelsäure mittels Enzymatik.
Geeignet für Malz, Würze, Bier, Malzgetränke, Nährbier, Biermischgetränke, alkoholfreie Erfrischungsgetränke, AFG, Fruchtsaft, Erfrischungsgetränke, Säfte, Getränke.
L-Äpfelsäure (L-Malat) wird durch Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid (NAD) in Gegenwart von L-Malat-Dehydrogenase (L-MDH) zu Oxalacetat oxidiert:
\(\text{L-Äpfelsäure (Malat) + NAD}^+ \space ^{\underrightarrow{\text{L-MDH}}} \space \text{Oxalacetat}\text{ + NADH + H}^+\)
Das Gleichgewicht dieser Reaktion liegt weitgehend auf der Seite von Malat. Es kann jedoch durch Abfangen des Oxalacetats mit Hilfe der nachgeschalteten Reaktion mit dem Enzym Glutamat-Oxalacetat-Transaminase (GOT) in Gegenwart von L-Glutamat auf die Seite von Oxalacetat und NADH + H+ verschoben werden:
\(\text{Oxalacetat + L-Glutamat} \space ^{\underrightarrow{\text{GOT}}} \space \text{L-Aspartat + 2-Oxoglutarat}\)
Die während der Reaktion gebildete NADH+H+-Menge ist der L-Äpfelsäure äquivalent und wird aufgrund seiner Absorption bei 340 nm photometrisch bestimmt.