B-590.48.530 [2020-10] Vitamin B1 – Mikrotiterplattentest

Zahlreiche Getränke, wie z. B. Multivitaminsäfte und Sportlergetränke, werden mit Vitaminen angereichert. Der Zusatz von Vitaminen und deren Auslobung ist nur ab einer sogenannten „signifikanten Menge“ möglich, die in Anhang XIII der LebensmittelinformationsVO 1169/2011 definiert ist. Sie beträgt bei Getränken min. 7,5 %/100 ml bzw. bei Einzelportionspackungen min. 15 %/Portion der Nährwertbezugswerte (NRV=Nutrition refernce values).

Referenzmengen für die tägliche Zufuhr von Vitaminen:

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Aufgabenstellung/Zweck

Bestimmung des Gehaltes an zugesetztem Vitamin B1 mittels mikrobiologischem Mikrotiterplattentest

Anwendungsbereich

Geeignet für AFG, Säfte, Lebensmittel

Prinzip

Der VitaFast® Vitamin B1 (Thiamin) Mikrotiterplattentest ist ein mikrobiologisches Verfahren zur Bestimmung des Gesamtgehaltes an Vitamin B1 in Lebensmitteln und Getränken.
Zur Bestimmung des zugesetzten Vitamin B1 wird das Getränk steril filtriert und mit sterilem Wasser aus dem Testkit verdünnt.
Zur Bestimmung des Gesamtgehaltes an Vitamin B1 (natürliches und zugesetztes) muss die Probe durch eine enzymatische Hydrolyse aufgeschlossen werden.

Das Vitamin-B1-Assay-Medium und die verdünnte Probe werden in die Kavitäten einer Mikrotiterplatte gegeben, die mit Lactobacillus fermentum beschichtet sind. Lactobacillus fermentum ist auf die Anwesenheit von Vitamin B1 angewiesen. Nach Zugabe von Vitamin B1 als Standard oder als in einer Probe enthaltenes Vitamin wächst der Keim solange, bis das Vitamin aufgebraucht ist. Die Inkubation erfolgt bei 37 °C für 44‑48 h.
Das Wachstum von Lactobacillus fermentum in Abhängigkeit vom Vitamin B1 wird als Trübung gemessen und mit einer Standardkonzentrationsreihe verglichen. Die Messung erfolgt im Mikrotiterplattenphotometer bei 610‑630 nm (alternativ bei 540‑550 nm).

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